沙門氏血清分型是沙門氏菌檢測(cè)及鑒定的重要環(huán)節(jié)。常規(guī)沙門氏菌血清分型操作繁瑣,用時(shí)較長(zhǎng),需要檢測(cè)人員具有豐富的血清分型經(jīng)驗(yàn),同時(shí)對(duì)試劑(血清)的質(zhì)量有較高要求。
血清學(xué)鑒定是沙門氏血清檢驗(yàn)中的重要鑒定方法,包括菌體抗原(O)鑒定、鞭毛抗原(H)鑒定和Vi抗原鑒定。由于血清學(xué)試驗(yàn)涉及的內(nèi)容很多,所以我們?cè)诖私o大家列出幾個(gè)常見問題,以供大家參考。
1、判定沙門氏菌時(shí)以那種結(jié)果為主?
我們?cè)谂卸〞r(shí)應(yīng)該以生化試驗(yàn)結(jié)果為主,在生化試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行血清學(xué)判定。有的試驗(yàn)人員會(huì)直接用多價(jià)血清進(jìn)行試驗(yàn),不進(jìn)行生化試驗(yàn),這是不可取的。因?yàn)檠鍖W(xué)的原理是抗原抗體結(jié)合,非沙門氏菌的微生物也有可能帶有沙門的類似抗原的。所以我們做鑒定的時(shí)候,必須*行生化試驗(yàn),在生化試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行血清學(xué)鑒定。
2、血清學(xué)試驗(yàn)要做到什么程度?
如果我們只需要鑒定某個(gè)菌株是否屬于沙門氏菌,那只需要做O多價(jià)和H多價(jià)血清就可以了。如果需要鑒定某個(gè)菌株具體是什么沙門氏菌,比如是否為鼠傷寒沙門氏菌或是否為腸炎沙門氏菌,那就需要進(jìn)行血清學(xué)分型試驗(yàn),從多價(jià)血清一直做到O抗原和H抗原的單因子,然后參照沙門氏血清檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中附錄B的表格查找對(duì)應(yīng)的沙門菌名。
3、O多價(jià)血清不凝集,就一定是O抗原陰性么?
我們?cè)谧鯫多價(jià)血清時(shí),如果沒有凝集并不能直接判定為陰性,因?yàn)槲覀冞€要考慮Vi抗原的影響。Vi抗原屬于K抗原群,是會(huì)阻隔O抗原和相應(yīng)抗體的結(jié)合,所以有Vi抗原存在時(shí),O多價(jià)血清是不會(huì)凝集的。GB4789.4-2010沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中提到已知具有Vi抗原的菌型有:傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌和都柏林沙門氏菌。
因此,我們必須去除Vi抗原的影響。具體方法是將待檢菌做成濃菌液,放入100℃沸水中煮沸15-60分鐘,目的是破壞Vi抗原,然后再挑取菌液做O多價(jià)沙門氏血清。如果還是不凝集,才能判定為陰性。