西尼羅河檢測(cè)試劑可用于定性檢測(cè)人血清中的西尼羅病毒IgM抗體,用于臨床實(shí)驗(yàn)室診斷臨床上有與腦膜腦炎癥狀相的病人西尼羅病毒的感染。陽(yáng)性的結(jié)果必需用蝕斑減少中和試驗(yàn)(PRNT)來(lái)證實(shí),或者使用現(xiàn)有的CDC的的指南來(lái)確診該疾病。
西尼羅河熱(WestNilefever)是由西尼羅病毒經(jīng)蚊子傳播的急性發(fā)熱性疾病可侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng),引起腦炎。在非洲南歐、中東、中亞和西亞大洋洲等地呈地方性流行。臨床表現(xiàn)主要有發(fā)熱、皮疹和淋巴結(jié)腫大侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng),可產(chǎn)生腦炎癥狀。
西尼羅河檢測(cè)試劑基于雙夾心法原理:未知的樣本與質(zhì)控品加入到微孔(包被有抗人IgM)中進(jìn)行溫育,樣本中的特異性抗體會(huì)結(jié)合到微孔板上。洗板之后分別加入西尼羅河病毒抗原(WNRA)和普通細(xì)胞抗原(NCA)進(jìn)行反應(yīng)。
再次洗板后加入酶聯(lián)物,用于檢測(cè)所結(jié)合的抗原。三次洗板后加入底物液,一段時(shí)間后加入終止液終止顏色反應(yīng),溶液變?yōu)辄S色。450nm下測(cè)量OD值。結(jié)果中WNRA與NCA的比值ISR可用于結(jié)果的判定。
在使用前將所有試劑和樣品平衡至室溫,并輕輕倒轉(zhuǎn)使其充分混勻。將10X的濃縮洗滌液稀釋,將120ml的濃縮洗滌液加上1080ml的蒸餾水,搖勻,至無(wú)任何沉淀,稀釋好的洗滌液可在室溫下放置兩個(gè)星期。
準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)所需的板條,剩余的板條應(yīng)盡快放入袋子里重新密封,在2-8℃下儲(chǔ)存至保質(zhì)期。