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利什曼蟲檢測試劑

利什曼蟲檢測試劑

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利什曼蟲檢測試劑

  • 產(chǎn)品描述

預期使用

    該檢測條用于診斷內(nèi)臟利什曼病,利用快速的免疫層析法在人血清中定性檢測杜氏利什曼原蟲(L. donovani)抗體。該實驗有助于診斷內(nèi)臟利什曼?。?/span>VL)。并只用于體外診斷。

實驗原理

  該檢測條的硝化纖維膜在實驗區(qū)包被了rK39,在質(zhì)控區(qū)包被了雞抗蛋白A。在實驗中,血清樣本與膠體金共軛物(膠體金標記的蛋白A)反應,而膠體金共軛物預先包被在檢測條上?;旌衔镌诿毠茏饔孟卵刂趸w維膜移動,然后與重組的VL抗原反應,并生成一條紅色帶。如果存在該紅色帶表明陽性結果,反之則為陰性結果?;旌衔锢^續(xù)移動,到達固化的雞抗蛋白A區(qū)(質(zhì)控區(qū)),會在質(zhì)控區(qū)生成一條紅色帶。質(zhì)控區(qū)紅色帶的出現(xiàn)說明樣本體積充足、液體流動適宜和作為對試劑的質(zhì)控。

保存方法

    該密封袋或者瓶中含實驗檢測條應保存在2028℃(室溫)直至有效期。瓶中含捕獲緩沖液也應保存在2028℃。暴露在超過30℃溫度下會影響實驗性能,所以應盡量避免。檢測條不應冰凍保存。從密封袋中取出后應在1小時內(nèi)使用,避免受濕度影響。

血清的采集

1該實驗中應使用人血清。全血樣本不應采用,因為過度的背景可能會影響正確讀取實驗帶。應使用緩沖液稀釋血清,避免直接開始實驗。陽性血清應使用陰性血清進行稀釋。

經(jīng)凝血后離心分離血清,盡量避免溶血。

應在采集血清后盡快開展實驗。血清不能長時間存放在室溫下。血清于2-8℃可保存3天。否則血清應保存在20℃以下。

實驗前血清平衡至室溫。冰凍的血清必須充分融解。血清避免反復凍融。

如果血清需要運輸,其包裝應該符合聯(lián)邦的傳染源運輸法規(guī)。

試劑盒成分

該黑熱病快速檢測條的硝化纖維膜在實驗區(qū)包被了重組的rK39,在質(zhì)控區(qū)包被了雞抗蛋白A。試劑盒的成分如下:

1、25份的獨立包裝檢測條或者25份檢測條于一個含干燥劑瓶子中。

2、1瓶的捕獲緩沖液

實驗步驟

實驗前讓血清平衡至室溫。

從密封袋或瓶中取出黑熱病快速檢測條

在檢測條箭頭下方加入20 ul的血清。

將檢測條置于實驗管中,或者96孔的組織培養(yǎng)板的微孔中,根據(jù)檢測條上的箭頭,其末端應該朝下。

加入2-3滴(150ul)的捕獲緩沖液

10分鐘內(nèi)讀取結果。在讀取結果前,背景的清晰是十分重要的。尤其是當樣本為低滴度的抗利什曼原蟲抗體時,就只有一條很弱的色帶出現(xiàn)在實驗區(qū)(T)。10分鐘后讀取可能會導致錯誤結果。

注意:不要只是加入捕獲緩沖液進行實驗。必須首先加入20ul的血清。

      如果在加入捕獲緩沖液后的10-15秒并沒有觀察到膠體金的移動,可輕輕壓檢測條上的樣本加入?yún)^(qū),直到觀察到膠體金的移動。

結果解釋

陽性結果

實驗陽性則質(zhì)控帶和實驗帶均出現(xiàn),如圖1。陽性結果表明檢測到杜氏利什曼原蟲抗體。一條微弱的色帶也為陽性結果。作為解釋指南,實驗區(qū)的紅色帶的顏色強度與抗利什曼原蟲抗體濃度相關。實驗帶為“弱陽性"血清樣本,實驗結果可能為弱陽性紅色帶與紅點之間,幾乎為白色背景(“弱陽性"樣本則含有對重組抗原低親和力或者低滴度抗體)。

陰性結果

實驗為陰性,則只有質(zhì)控帶出現(xiàn)。一個陰性結果表明無檢測到杜氏利什曼原蟲抗體。沒有出現(xiàn)實驗帶,如圖2

無效結果

則無出現(xiàn)質(zhì)控帶也沒有出現(xiàn)實驗帶。如果沒有出現(xiàn)質(zhì)控帶該實驗也無效,即使出現(xiàn)了實驗帶。建議使用新的檢測條和新血清再次進行實驗。

注意:實驗區(qū)的紅色帶的變化是依賴于抗利什曼原蟲抗體濃度。然而,該實驗不能檢測抗體的定量值和增加的百分比。

預期值:

在流行的地區(qū),該黑熱病快速檢測條靈敏度為90%或更高。而特異性可能因不能地區(qū)而不同。例如在印度104名健康人中超過13名為陽性反應。

本譯文由廣州健侖生物科技有限公司編譯,僅供參考,請以原說明書為準或與我們公司工作人員!

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