- 產(chǎn)品描述
美洲錐蟲(chóng)核酸質(zhì)控(PCR)
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廣州健侖生物科技?有限公司
本司長(zhǎng)期供應(yīng)尼古?。商鎸帲z測(cè)試劑盒,其主要品牌包括美國(guó)NovaBios、廣州健侖、廣州創(chuàng)侖等進(jìn)口產(chǎn)品,國(guó)產(chǎn)產(chǎn)品,試劑盒的實(shí)驗(yàn)方法是膠體金方法。
我司還有很多違禁品檢測(cè)、激素檢測(cè)、疫病類(lèi)檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)等抗原抗體原料,還有熒光FITC標(biāo)記類(lèi)抗體、各種可標(biāo)記單抗以及免疫磁珠等等產(chǎn)品以及各種生物原料和核酸質(zhì)控品等,。
我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲(chóng)病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌、化妝品檢測(cè)、食品安全檢測(cè)等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
美洲錐蟲(chóng)核酸質(zhì)控(PCR)
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(PCR)
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【公司名稱(chēng)】 廣州健侖生物科技有限公司
【】 楊永漢
【】
【騰訊 】
【公司地址】 廣州清華科技園創(chuàng)新基地番禺石樓鎮(zhèn)創(chuàng)啟路63號(hào)二期2幢101-3室
【企業(yè)文化宣傳】(PCR)
1. OsAGAP原位雜交正義、反義探針制備
對(duì)OsAGAP cDNA全長(zhǎng)喺GenBank中做BLAST分析,撈取招異性zui強(qiáng)嘅片段(767bp-987bp)用于探針制備,據(jù)此設(shè)計(jì)5’四引子:5’-CTC TCA AAC TGC AAGCGT-3';三’四引子:5’-CAG CTC CTG CCT CAC CT-3'。將利用呢對(duì)引子擴(kuò)增到嘅OsAGAP(767bp-987bp)片段,分別就以正向同反向鏈接到T easy載體上,用于探針制備。
利用DIG T7/SP6 Labeling kit(Roche)嚟做正義同反義探針嘅嘅高辛識(shí)認(rèn),反應(yīng)程式依據(jù)其用戶手冊(cè)放。正義、反義探針?lè)謩e就采用T7、SP6 RNA polymerase進(jìn)行識(shí)認(rèn)。攞線性化嘅質(zhì)粒模板1ug,加DEPC處理嘅雙蒸水至13ul;理中加:
10 X NTP labeling mixture 2ul;
10 X Transcription buffer 2ul;
RNase inhibitor 1ul;
T7/SP6 RNA polymerase 2ul。
輕柔撈勻之后,37℃,溫育2hr;加2ulRNase-free嘅DNase15min,抹得甩DNA模板;37℃,溫育電泳肯定探針標(biāo)好同模板抹得甩后,加2ul0.2M嘅EDTA(pH8.0)終止反應(yīng);加2.5ul4M LiCI,lul l0mg/ml tRNA同75ul無(wú)水乙醇,撈之后,-20℃沉淀過(guò)夜;4℃,13000rpm離心10min,去上清;沉淀用70%乙醇洗2次;超凈系臺(tái)吹干,溶于100ulDEPC處理嘅ddH2O中,55℃溫育l0min,分裝、存于-70℃士啤。
いち。OsAGAP元交雑正義、反義プローブ調(diào)製
OsAGAPにcDNA全長(zhǎng)我GenBankでBLAST分析し、zui強(qiáng)の斷片をすくう異性(767bp-987bp)用プローブ調(diào)製、この設(shè)計(jì)ご』の四プライマー:ご」- CTC TCA AAC TGC AAGCGT-3 ';3』の四一聲:ご」- CAG CTC CTG連続冷卻変態(tài)CAC CT-3 '。を利用してねまくら増幅OsAGAP(767bp-987bp)までの斷片を、それぞれ同じでは逆にリンクeasy擔(dān)體にT用プローブ調(diào)製。
利用DIG T7 / SP6 Labeling kit(Roche)して大量に正義と反義プローブの意識(shí)の高い辛見(jiàn)分けて、反応によってそのプログラムマニュアル。正義、反義プローブがそれぞれ採(cǎi)用T7、SP6 RNA polymeraseを識(shí)る。破る線形化の1ugプラスミドテンプレートに加え、DEPC処理の雙蒸水から13ul ;理に加:
じゅうX NTP labeling mixture 2ul、
じゅうX Transcription buffer 2ul、
RNase inhibitor 1ul、
T7 / SP6 RNA polymerase 2ul。
なめらかに均等にすくい後、37℃で、インキュベーション2hr;2 ulRNase-freeのDNase15min拭いて、振られDNAテンプレート; 37℃で、インキュベーション電気泳動(dòng)肯定プローブ標(biāo)いいつけて同テンプレートに振られた後、2 ul0.2MのEDTA(pH8.0)停止反応;加2.5ul4M LiCI、lul l0mg / ml tRNA同75ul無(wú)水エタノール、すくい取って- 20℃の瀋殿泊まります;4℃で、13000rpm遠(yuǎn)心10min、清;瀋殿で70%エタノール2回入る;超純係臺(tái)溶け、乾い100ulDEPC処理のddH2Oで、55℃インキュベーションl0min、充填、在庫(kù)は- 70℃士ビール。