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兔抗人IgG?
廣州健侖生物科技?有限公司
本司長期供應尼古丁(可替寧)檢測試劑盒,其主要品牌包括美國NovaBios、廣州健侖、廣州創(chuàng)侖等進口產品,國產產品,試劑盒的實驗方法是膠體金方法。
我司還有很多違禁品檢測、激素檢測、疫病類檢測、腫瘤標志物檢測等抗原抗體原料,還有熒光FITC標記類抗體、各種可標記單抗以及免疫磁珠等等產品以及各種生物原料和質控品等,。
我司還提供其它進口或國產試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌、化妝品檢測、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。
兔抗人IgG?
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以下是出售的一小部分產品
羊抗鼠 IgG |
抗人 IgMµ 鏈單抗 |
兔抗熒光素(FITC) |
兔抗大鼠 IgG |
兔抗人 IgG |
羊抗人 IgG |
羊抗兔 IgG |
兔抗小鼠 IgG |
抗人 CD3 單抗 (T3,Leu-4) |
抗人 CD4 單抗 (T4,Leu-3) |
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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【】 楊永漢
【】
【騰訊 】
【公司地址】 廣州清華科技園創(chuàng)新基地番禺石樓鎮(zhèn)創(chuàng)啟路63號二期2幢101-3室
【企業(yè)文化宣傳】?
5。DNA嘅提取
將五個L L哺育緩沖液加到個個結合位,以降低SDS濃度為0.5% SDS:
1)添加0.33體積(330μL)酚/lv仿;渦旋同旋轉(13000轉,十分鐘,離心)。將有機相介面;呢,系用嚟隔離免疫沉淀蛋白(見下文)。
2)轉移水上清液等體積(1毫升)嘅苯酚/lv仿;渦旋同旋轉(13000轉,十分鐘,離心)
3)轉移上清液等體積(1毫升)lv仿;渦旋同旋轉(13000轉,十分鐘,離心)
4)轉移嘅S / N到個干凈嘅離心理中,加0.1體積(100μL)4 Mlv化鋰,五十μ克糖原(分子生物學級,溶解喺dh20喺2毫克/毫升)為載體,乙醇4押。*渦旋并喺二十°C.過夜。
5)離心樣品(13000克,三個字)沉淀DNA。
6)洗滌沉淀用70%乙醇溶解,DNA喺250μL TE緩沖液。
7)儲存樣品喺二十°C.或者繼續(xù)進行檢測方法(PCR、微陣列等)。
8)PCR用于定量檢測招定位啲嘅DNA水平。呢個系半定量分析(瓊脂糖凝膠PCR產物分析)設計引子,可使用此工具設計。
或者,透過即時PCR定量檢測DNA水平。引子同探針通常使用即時PCR儀講嚇嘢喇!嘅軟件進行設計。
6。蛋白質分離架嘛!
1)先酚/lv仿相(見DNA分離架嘛;1)加5μl一1毫克/毫升嘅溶液BSA(作為載體),0.01押(4μL)10 M鏹水同丙酮12押。
2)降水量喺二十°C.洗蛋白顆粒一旦酸化丙酮后(1:6 100毫米鏹水:丙酮)同糠嘅丙酮三次。蛋白質可以通過SDS-PAGE分析。
5。dna分離
各結合畫分を500μlの培養(yǎng)バッファを追加するには、. 5 % sdsをsds濃度を低減する。以下の非束縛として扱われ、結合畫分
1)に加えて. 33巻(330μl)フェノール/クロロホルム渦とスピン(13000 rpm、10分、エッペン)。有機相とのインタフェースを保つこの免疫沈降蛋白質分離に使用されている(下記參照)。
2)と同等のボリュームへの水溶液(1 . ml)フェノール/クロロホルムの渦とスピン(13000 rpm、10分、エッペン)
3)と同等のボリュームに上澄液移動(1 . ml)のクロロホルムの渦とスピン(13000 rpm、10分、エッペン)
4)移動のs/nきれいな遠心管を追加. 1巻(100μl)を4 m licl、50μgのグリコーゲン(られ中に溶解した2 mg/mlでは分子生物學)のキャリアとエタノールの4巻とした。渦と徹底的に−20°cで一泊した。
5)遠心試料(1萬3000 g、15分)dnaを沈殿させる。
6)70 %エタノールでペレットを洗って、250μlでteバッファのdna再溶解します。
7)店のサンプルで20°cまたは検出法(pcr、マイクロアレイなど)。
8)pcr特異的遺伝子座のdna濃度を定量化するために使用されます。この半定量的分析(アガロースゲルでのpcr生成物の分析は、このツールを使用して設計されることができるプライマーを用いた。
また、dnaレベルをリアルタイムpcr法により定量的に測定した。プライマーとプローブをリアルタイムpcr裝置を備えたソフトウェアを使用して設計される場合が多い。
6。蛋白質の分離
1)へのzui初のフェノール/クロロホルム相(dna分離に加え1)を見て5μlの1 mg/mlのbsa溶液(キャリアとして使用される)、第(4 . 01μl)10 m h 2 so 4とアセトンのvol . 12。
2)降雨−20°c蛋白質ペレットを一度洗って酸性アセトン中での後の(1 : 6 h 2 so 4:アセトン100 mm)と乾燥したアセトン中での3回。sds‐pageによる蛋白質を分析することができます。
5. DNA Isolation
Add 500 μl incubation buffer to each bound fraction, to reduce the SDS concentration to 0.5% SDS.Unbound and bound fractions then treated as follows:
1) Add 0.33 vol (330 μl) phenol/chloroform; vortex and spin (13,000 rpm, 10 min, microcentrifuge). Keep the organic phase and interface; this is used to isolate immunoprecipitated proteins (see below).
2) Transfer the aqueous supernatant to an equal volume (1.0 ml) of phenol/chloroform; vortex and spin (13,000 rpm, 10 min, microcentrifuge)
3) Transfer supernatant to an equal volume (1.0 ml) of chloroform; vortex and spin (13,000 rpm, 10 min, microcentrifuge)
4) Transfer S/N to a clean centrifuge tube and add 0.1 vol (100 μl) 4 M LiCl, 50 μg glycogen (Molecular biology grade, dissolved in dH20 at 2 mg/ml) as a carrier and 4 vol of ethanol. Vortex thoroughly and leave at -20°C overnight.
5) Centrifuge samples (13,000 g, 15 min) to precipitate the DNA.
6) Wash the pellet with 70% ethanol and redissolve the DNA in 250 μl TE buffer.
7) Store samples at -20°C or proceed with detection method (PCR, microarray, etc).
8) PCR is used to quantify DNA levels of specific loci. This is analyzed semi-quantitatively (analyses of PCR endproduct by agarose gel) using primers which can be designed using this tool.
Alternatively, DNA levels are quantitatively measured by real-time PCR. Primers and probes are often designed using software provided with the real-time PCR apparatus.
6. Protein Isolation
1) To the first phenol/chloroform phase (see DNA isolation; step1) add 5 μl of a 1 mg/ml solution of BSA (to be used as a carrier), 0.01 vol (4 μl) 10 M H2SO4 and 12 vol of acetone.
2) After precipitation at -20°C wash the protein pellets once in acidified acetone (1:6 100 mM H2SO4:acetone) and 3 times in dry acetone. Proteins can be analyzed by SDS-PAGE.
1。マウス胚性線維芽細胞の調製(mef)フィーダー細胞層
1)についての頭を殘して12 . 5 dpc icrまたはcd‐1マウス胚を骨抜きにし、pbsリンス(p7059)とひき肉のドライ60 mmのペトリ皿の中では約3?5分のためにはさみで。
2)37°c 5 mlを加えトリプシン(t5266)マウスにつき、5分のための5 mlの組織培養(yǎng)ピペットで分注mefは絶えず、成長媒體20 mlで50 mlのチューブへの移動(dmem媒體(d5796)10 % fbs(f6178)、glutamax、ペニシリンやストレプトマイシン(g6784)と遠心分離機の5分のための1000 rpm程度で。
3)上澄みを取り除いてmef増殖培地におけるペレットを再懸濁する。
4)板ゼラチン被覆板の上にサスペンションを150 mmの板につき1 . 5の胚の密度での(p)。
5)一度拡大mef(分割)は通常の範囲內で2日間1–と凍結(p 1)。
6)を加えて10 g / mlµマイトマイシンc(mefs m4287)の合流板のメディアへの3時間37℃で培養(yǎng)する。
7)50?60萬細胞/cm 2の密度でmef成長媒體中のトリプシン処理と板によって収穫。
8 . 1)ゼラチンとpreを扱う板(g1393)は少なくとも4時間、そして板7 . 5×105細胞につき6ウェルプレートの井戸。少なくとも24時間5 % co 2による37℃で培養(yǎng)する。mefフィーダー層細胞は、現在hesメッキのための準備ができています。
2。ヒトes細胞の培養(yǎng)
1 . 5 ml)を. 05 mm edtaを加えtrypsin-0.53(t4049)が1つのウェル(hes)6ウェルプレートの、3?4分37°cでインキュベートし、小さな細胞凝集塊を生産するピペット(5)- 2細胞)。