- 產品描述
甲型H1N1(2009)核酸檢測試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
產品規(guī)格:50T/盒;
保存條件:避光 -20度 保存。
我司還提供各種流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠狀病毒、輪狀病毒、桿菌、鏈球菌、熱帶病毒等等核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法),還有各種原料和質控品,隨時歡迎您的來電: 楊
甲型H1N1(2009)核酸檢測試劑盒
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組織培養(yǎng)嘅單層細胞可用勻漿緩沖液裂解,都可直頭喺SDS凝膠加樣緩沖液中裂解;制備好嘅樣品用做SDS- PAGE分析。
2)電泳按常規(guī)方法進行SDS-PAGE。
2.蛋白質由凝膠轉移到NC膜上(半干式轉移)
1)戥頭凝膠:用轉膜緩沖液戥頭,5min×三次。
2)膜處理:將濾紙同NC膜,一同喺轉膜緩沖液中浸泡10min。
3)轉膜:
a.轉膜裝置由下至上依次按陽極碳黑、3層厚濾紙、PVDF尼龍膜、凝膠、3層厚濾紙、陰極碳板嘅順序放好,濾紙、凝膠、PVDF尼龍膜精確對齊,每一步抹得甩氣泡,上責500g重物,將碳板上面多余嘅液體吸干。
b.用支架夾緊上述各層,置電轉移槽中,NC膜一側靠正極,凝膠一側靠負極。接通電源,40V、約1.5A轉移1.5~6h。過咗時間長短依靶蛋白分子量大小嚟較。
c.轉移結束后,斷開電源將膜拎出,鎅攞對量膜條做免疫印跡。
d.將有蛋白Marker嘅條帶染色,放入膜染色液中50s后,喺50%甲醇中多次脫色,至背景清晰,跟住用對蒸水洗,風干夾于兩層濾紙中保存,留喺騷咸濕結果作對比。
3.免疫探測包畀轉印到膜上嘅靶抗原與*抗體(特異抗體)反應、與酵素標第二抗體(抗抗體)反應,與及用酵素相應嘅底物處理后進行靶蛋白(抗原)信號檢測。
1)用0.01mol/L PBS洗膜,5min×三次。
2)加封閉液(5%脫脂奶粉或者2%牛血清白蛋白),浸泡畀轉印膜,室溫或者37℃(平緩震緊)反應1~3h,以封閉轉印膜上啲非特異性蛋白質嘅潛在結合位點,逃過非特異性反應。
3)棄封閉液,用0.01mol/L PBS洗膜,5min×三次,振蕩。
4)將封閉好嘅轉印膜浸入*抗體溶液(按啱稀釋比例,用1/2量0.01mol/L PBS加1/2量封閉液稀釋)中,抗體液用量約0.2ml/cm2,37℃反應1~2h或者4℃反應12h以上,保持平緩震緊。陰性對照,以1%BSA取代一抗,其余步驟與實驗組相同。
5)棄一抗,用0.01mol/L PBS分別就洗膜,10min×三次,振蕩。
6)加辣根過氧化物酵素(HP)偶聯二抗溶液〔稀釋方法同(4)〕,室溫下反應1~2h,保持平緩震緊。
7)棄二抗,用0.01mol/L PBS洗膜,10min×4次,振蕩。