- 產(chǎn)品描述
泰國S&A沙門氏菌診斷血清套裝
沙門氏菌診斷血清套裝(60瓶)
試驗方法
O抗原檢測步驟
將沙門氏菌接種到非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上,35-37℃培養(yǎng)18-24小時。
- 滴一滴生理鹽水(0.85%氯化鈉)于潔凈載玻片上作為對照。從非選擇性瓊脂培養(yǎng)基平板上取一滿環(huán)培養(yǎng)物與載玻片上生理鹽水混合。30S內(nèi)凝集表明是粗糙型菌株。該菌株不能用于血清學分型。如果不凝集繼續(xù)進行血清學分型并記錄。
- 滴一滴沙門氏菌抗血清于潔凈載玻片的測試區(qū)域。從非選擇性瓊脂培養(yǎng)基平板上取一滿環(huán)培養(yǎng)物于抗血清上。將培養(yǎng)物與抗血清充分混合,輕輕晃動載玻片1分鐘。如果凝集表明菌株含有這種抗血清中特定的一種O抗原。
說明:
首先用O多價血清進行凝集,如果菌株與O多價血清發(fā)生凝集,則繼續(xù)使用O多價血清中包含的相應的群血清進行測定。如果菌株與某一O群血清發(fā)生凝集,則繼續(xù)使用該群包含的單因子抗血清進行測試。
Vi抗原檢測步驟
一些傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌和都柏林沙門氏菌可能出現(xiàn)與O抗血清不凝集,必須使用Vi抗血清進行測定。從營養(yǎng)瓊脂(NA)、胰胨大豆瓊脂(TSA)或三糖鐵瓊脂(TSI)上挑取新鮮培養(yǎng)物進行Vi抗血清測定。如果試驗結(jié)果顯示此培養(yǎng)物能與Vi抗血清發(fā)生凝集反應而不能與O抗血清發(fā)生凝集反應,則取兩環(huán)培養(yǎng)物懸浮于1mL普通生理鹽水中(NSS0.85%),100℃沸水浴15-60分鐘以破壞Vi抗原。取沉淀物用O抗血清重新進行玻片凝集試驗,應該是顯示陽性結(jié)果。
H抗原檢測步驟(Sven Gard技術(shù))
挑取非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物一環(huán)點種于Swarm Agar平板中間,35-37℃培養(yǎng)18-24小時。有動力的菌株在Swarm Agar平板表面蔓延生長。
- 分別滴一滴生理鹽水和一滴H抗血清于載玻片的兩個測試區(qū)域。
- 用接種環(huán)從Swarm Agar點種區(qū)邊緣挑取培養(yǎng)物,分別與生理鹽水和H抗血清充分混合。
- 輕微搖動載玻片30s至1min,觀察反應結(jié)果,菌株不應與生理鹽水凝集。
- 應先依次使用H多價抗血清進行測定。
對試驗結(jié)果的解釋
于1分鐘內(nèi)呈明顯凝集者為陽性,呈均勻乳白色混濁者為陰性。
注意事項
- 被檢菌應首先用O多價血清及O因子血清鑒定其O抗原,在必要時以Vi血清鑒定其Vi抗原,然后以H血清鑒定其鞭毛抗原,參考沙門氏菌屬診斷抗原表,并根據(jù)生化反應特性,做出菌型診斷。
- 生化反應符合沙門氏菌定義,但與O多價血清不凝集或用本組血清不能定型的菌株,可送往有條件定型的機構(gòu),做出菌型鑒定。
- 血清已用生理氯化鈉溶液稀釋,使用時不必再做稀釋。
- 防止凍結(jié),在有效期內(nèi)使用。
包裝和規(guī)格
紙盒包裝,每盒60種,共計60瓶(多價血清2Ml/瓶,單因子血清1Ml/瓶)。
沙門氏菌診斷血清套裝(60瓶)
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H抗原常有兩相的變異。*相為特異相,用小寫英文字母表示,如:a、b、I、e、h等;第二相為非特異相,用阿拉伯數(shù)字表示,如:1、2、5等,但也有少數(shù)菌含有*相中的抗原e、n、x等成分。 為O抗原表面的莢膜抗原。具有該抗原的細菌,由于可阻止O抗原與抗體結(jié)合,因此不被相應的O血清凝集。60℃加熱處理或石炭酸處理,雖然該抗原不被滅活,而已從菌體表面脫落,游離于液體中,從而暴露出O抗原,可被O血清凝集。