- 產(chǎn)品描述
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檢測由鐮刀菌產(chǎn)生的霉菌(T2毒素)檢測試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
檢測由鐮刀菌產(chǎn)生的霉菌(T2毒素)檢測試劑盒
原理:
本試劑盒采用一步競爭ELISA方法檢測玉米、大米、豆類、花生、燕麥、飼料等樣本中的T2毒素,試劑盒由預包被偶聯(lián)抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,酶標板微孔條上預包被T2毒素抗原與樣本中T2毒素競爭抗T2毒素抗體(抗體工作液),同時抗T2毒素抗體與酶標二抗(酶標記物)相結(jié)合,經(jīng)TMB底物顯色,樣本吸光值與其含有的T2毒素成負相關,與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中T2毒素的含量。
檢測下限:
花生、玉米、燕麥、大豆、飼料等/6ppb
花生、玉米、燕麥、大豆、飼料等樣品處理方法
1)取1g粉碎樣品,加入20ml樣品提取液;
2)劇烈振蕩5min;
3)室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘(或用定量分析濾紙過濾);
4)取上清液,用蒸餾水或去離子水按1∶5(即:取1份上清液+5份去離子水)比例稀釋;
5)取50μl進行分析。
稀釋倍數(shù):120 檢測下限:6ppb
酶聯(lián)免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
6.1 編 號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
6.2 加樣反應:加標準品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應30分鐘。
6.3 洗 滌:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
6.4 顯 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘(若藍色過淺,可適當延長反應時間)。
6.5 終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應。