- 產(chǎn)品描述
Qiagen 食品基因組DNA提取試劑盒
Qiagen 食品基因組DNA提取試劑盒
mericon Sample Preparation Kits適用于從多種初始材料中提純高品質(zhì)核酸,如經(jīng)富集的培養(yǎng)基(mericon DNA Bacteria和 Bacteria Plus Kits)及多種食物原材料與成品(DNeasy mericon Food Kit)等。這些復(fù)雜食物樣本的純化產(chǎn)物中所含PCR抑制劑的水平達(dá)到最低。純化獲得的DNA適用于各種下游應(yīng)用,如應(yīng)用mericon PCR Assays Kits進(jìn)行real-time PCR成分鑒定、病原體檢測(cè);或GMO DNA定量檢測(cè)。
性能 DNeasy mericon Food Kit 生產(chǎn)過(guò)程中,食物容易受到熱、高壓和pH值變化的影響,這些會(huì)導(dǎo)致DNA降解和片段化。DNeasy mericon Food Kit中的優(yōu)化試劑專(zhuān)為回收短的DNA片段(100 bp)而設(shè)計(jì),確保高度片段化的DNA可被有效分離,并在PCR反應(yīng)中進(jìn)行擴(kuò)增。憑借這些優(yōu)勢(shì),DNeasy mericon Food Kit是*個(gè)可廣泛應(yīng)用于從強(qiáng)抑制性、多脂、酸性、有很高或很低DNA含量的加工食物中純化核酸的試劑盒,結(jié)果可靠,而且可得到純化效果。 mericon DNA Bacteria和DNA Bacteria Plus Kits 熱裂解操作需使用mericon DNA Bacteria Kit,機(jī)械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,兩種試劑盒從革蘭氏陰性細(xì)菌中提取DNA的效率相同。但是,如果從革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌中提取DNA,機(jī)械裂解更加有效。 原理 DNeasy mericon Food Kit 該試劑盒采用改良的CTAB純化細(xì)胞內(nèi)核酸。CTAB是非離子去污劑,廣泛用于從多種類(lèi)型的組織樣本中高效提純細(xì)胞內(nèi)核酸。與鹽濃度相關(guān),CTAB可能與細(xì)胞內(nèi)核酸結(jié)合(低鹽濃度);也可與細(xì)胞內(nèi)的抑制劑結(jié)合,如多糖、蛋白質(zhì)和植物代謝產(chǎn)物(高鹽濃度,如在Food Lysis Buffer中)。 這種提純方法的步驟少于傳統(tǒng)CTAB 操作方法,應(yīng)用DNeasy mericon Food Kit可在2.5個(gè)小時(shí)內(nèi)可處理多達(dá)30個(gè)樣本見(jiàn) 經(jīng)優(yōu)化的方案,采用CTAB和蛋白酶K初步消化緊密組織,然后同時(shí)沉淀蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞內(nèi)和來(lái)自于食品本身的抑制劑。 離心后抑制劑沉淀下來(lái),而提純的DNA保留在溶液中。然后進(jìn)行抽提,所有剩余的、未沉淀CTAB結(jié)合蛋白、CTAB結(jié)合雜質(zhì)或 CTAB 結(jié)合多糖都將與其他脂溶性抑制劑一起被抽提入lv仿層。水層中含有DNA和極少的抑制劑,將進(jìn)一步處理。在水相中加入結(jié)合緩沖液(調(diào)節(jié)結(jié)合條件),將其上樣到QIAquick Spin Column。純化后得到的DNA可即用于下游的mericon real-time PCR分析。 mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit 到目前為止,檢測(cè)食品病原體的主要方法是通過(guò)培養(yǎng)基和/或ELISA分析法。分子檢測(cè)方法,尤其是real-time PCR,經(jīng)常作為這些常用方法的補(bǔ)充。 熱裂解使用mericon DNA Bacteria Kit,適用于多數(shù)易于裂解的革蘭氏陰性細(xì)菌(如沙門(mén)氏菌Salmonella spp.、彎曲桿菌Campylobacter spp. 和阪崎氏腸桿菌Cronobacter spp.)。機(jī)械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit,適用于革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,如單增李斯特菌Listeria spp.。 mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit中的化學(xué)試劑可提高裂解效率,穩(wěn)定提純的DNA,并去除可能干擾下游應(yīng)用的抑制劑。 操作流程 DNeasy mericon Food Kit 使用簡(jiǎn)單的操作方法,從勻質(zhì)的食物樣本中提純DNA,獲得的純DNA適用于各種下游應(yīng)用,如real-time PCR成份分析或GMO檢測(cè)。 mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit 使用機(jī)械裂解(鋼珠)和熱裂解(煮)的操作方法,從病原體富集的培養(yǎng)基中提純細(xì)菌DNA。兩種操作方法都需轉(zhuǎn)移細(xì)菌 DNA懸浮液,以適用于real-time PCR病原體檢測(cè)。 應(yīng)用 應(yīng)用DNeasy mericon Food Kit從食物原材料或成品中純化的DNA適用于各種下游應(yīng)用,如成份鑒定。 mericon Bacteria和Bacteria Plus Kits用于從經(jīng)過(guò)增菌富集培養(yǎng)基中純化細(xì)菌DNA。
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