- 產(chǎn)品描述
【用途】
用來檢測雞血清中的禽傳染性支氣管炎病毒(IBV)抗體
【試驗原理】
臨床上,傳染性支氣管炎是一種急性、高度傳染的病毒性疾病,任何日齡的雞都可以感染。IBV的潛伏期為24-72小時。疾病侵害雞的呼吸系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)。青年雞表現(xiàn)為急性呼吸道癥狀及氣管損傷。死亡率可高達100%。血清中的病毒抗體可通過酶聯(lián)免疫的方法檢測。血清中的IBV抗體水平及整個雞群的免疫狀況可用ELISA方法進行監(jiān)測。
將滅活的抗原包被在微孔板上,加入稀釋后的血清并孵育,血清中的抗IBV抗體將與包被在微孔板上的IBV結(jié)合,形成IBV抗原-抗體復(fù)合物。然后洗掉未結(jié)合的物質(zhì),加堿性磷酸酶標記的抗雞IgG的酶標結(jié)合物至微孔板中,酶標物將與IBV抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。孵育后洗掉未結(jié)合的結(jié)合物,然后加入底物溶液。底物與堿性磷酸酶反應(yīng)并生成一種黃色的產(chǎn)物,zui后終止反應(yīng),將顏色固定。顏色的深淺可用酶標儀(405-410nm)測定。
【一個微孔板所需的試劑的量】
抗原包被微孔板 | 12×8條(板) |
樣品稀釋液(1×) | 120ml |
洗滌液(1×) | 500ml |
陽性對照 | 2μl |
陰性對照 | 2μl |
結(jié)合物 | 12ml |
底物液 | 12ml |
終止液 | 12ml |
【所需物品】
1. 能夠吸取2μl、100μl和800μl的精確移液器
2. zui大吸取100μl的多通道移液器
3. 計時器
4. 量筒
5. 蒸餾水
6. 洗板機
7. 稀釋用容器
8. 能夠讀雙波(405-410nm和630-650nm)的酶標儀,OD值讀數(shù)zui大可達到3.0
【樣品收集】
采集至少0.5ml全血,分離血清并放在冰箱里,2-7℃用于短期儲存,如果長期儲存,應(yīng)冷凍,且避免反復(fù)凍溶。如果樣品含有可見的顆粒物質(zhì),應(yīng)在檢測之前將其離心除去,嚴重污染的樣品不允許使用(如高度渾濁、細菌污染等)
【結(jié)果計算】
將陽性對照吸光度值和樣品吸光度值分別減去陰性對照吸光度值,注意:對照品及樣品吸光度值都應(yīng)該是2個重復(fù)孔的平均值。每個樣品的計算式如下:
將陽性對照吸光度值和樣品吸光度值分別減去陰性對照吸光度值,注意:對照品及樣品吸光度值都應(yīng)該是2個重復(fù)孔的平均值。每個樣品的計算式如下:
樣品平均吸光度值-陰性對照吸平均吸光度值 | =樣品與陽性對照比值(Sp) |
陽性對照平均吸光度值-陰性對照平均吸光度值 |
Sp ×(100)= ELISA Unit (EU) 陽性對照值設(shè)為100 EU
【結(jié)果判定及EU單位說明】
IBV ELISA 值 說明
小于10EUs IBV抗體為陰性
10-15 EUs IBV抗體為弱陽性,應(yīng)被認為經(jīng)過免疫或暴露于IBV,油乳狀疫苗也可能引起非特異性低水平抗體。
15-75 EUs IBV抗體適度陽性
>75 EUs IBV抗體強陽性
【結(jié)果判定及EU單位說明】
IBV ELISA 值 說明
小于10EUs IBV抗體為陰性
10-15 EUs IBV抗體為弱陽性,應(yīng)被認為經(jīng)過免疫或暴露于IBV,油乳狀疫苗也可能引起非特異性低水平抗體。
15-75 EUs IBV抗體適度陽性
>75 EUs IBV抗體強陽性
【操作步驟】
1. 將試劑回溫至室溫,通過顛倒和渦旋將試劑混勻。
2. 將1份4×樣品稀釋液加入到含3份去離子水的容器中,充分混勻,例如,30ml 4×樣品稀釋液加入到90ml去離子水中。
3. 將1份20×洗滌液加入到含19份去離子水的容器中,充分混勻,例如,25ml 20×洗滌液加入到475ml去離子水中。
4. 稀釋前將陽性對照、陰性對照和樣品震蕩均勻。
5. 陽性對照、陰性對照和樣品均需要用樣品稀釋液稀釋后使用。稀釋比例為2μl :800μl。將移液器調(diào)到100μl,反復(fù)吹打4次使之充分混勻。
6. 將稀釋后的陰性對照、陽性對照分別加入微孔中,每種做兩個平行,每孔100μl;將稀釋后的樣品100μl分別加入孔中,室溫下靜置30分鐘。
7. 棄去微孔板中溶液,每孔加入300μl洗滌液洗滌,重復(fù)洗滌2次,在洗滌過程中防止酶標板變干。
8. 每孔立即加入100μl結(jié)合物,室溫靜置30分鐘。
9. 重復(fù)步驟7進行洗板。
10. 每孔立即加入100μl底物,室溫靜置30分鐘。
11. 不要倒掉板內(nèi)液體,每孔立即加入100μl終止液。
12. 用酶標儀雙波讀數(shù)(405nm或410nm作為主要波長,630nm或650nm為參考波長),計算結(jié)果。
1. 將試劑回溫至室溫,通過顛倒和渦旋將試劑混勻。
2. 將1份4×樣品稀釋液加入到含3份去離子水的容器中,充分混勻,例如,30ml 4×樣品稀釋液加入到90ml去離子水中。
3. 將1份20×洗滌液加入到含19份去離子水的容器中,充分混勻,例如,25ml 20×洗滌液加入到475ml去離子水中。
4. 稀釋前將陽性對照、陰性對照和樣品震蕩均勻。
5. 陽性對照、陰性對照和樣品均需要用樣品稀釋液稀釋后使用。稀釋比例為2μl :800μl。將移液器調(diào)到100μl,反復(fù)吹打4次使之充分混勻。
6. 將稀釋后的陰性對照、陽性對照分別加入微孔中,每種做兩個平行,每孔100μl;將稀釋后的樣品100μl分別加入孔中,室溫下靜置30分鐘。
7. 棄去微孔板中溶液,每孔加入300μl洗滌液洗滌,重復(fù)洗滌2次,在洗滌過程中防止酶標板變干。
8. 每孔立即加入100μl結(jié)合物,室溫靜置30分鐘。
9. 重復(fù)步驟7進行洗板。
10. 每孔立即加入100μl底物,室溫靜置30分鐘。
11. 不要倒掉板內(nèi)液體,每孔立即加入100μl終止液。
12. 用酶標儀雙波讀數(shù)(405nm或410nm作為主要波長,630nm或650nm為參考波長),計算結(jié)果。
【公司名稱】廣州健侖生物科技有限公司
【】
【】
【電子郵件】 Service@jianlun.com
【騰訊 】 712628580 712628581 712628582
【公司】 www.jianlun.com
【公司地址】廣州市天河區(qū)車陂第十五工業(yè)園一幢4067室
說明書下載:http://www.jianlun.com/download/Products/qin/雞傳染性支氣管炎抗體檢測試劑盒-使用說明書.pdf
禽疫病檢測系列產(chǎn)品(健侖生物榮譽出品)
編碼 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 檢測方法 |
禽病檢測系列 | |||
JL3101 | 雞新城疫抗體檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3102 | 雞新城疫抗原金標檢測卡 | 20T/盒 | 金標層析卡 |
JL3103 | 雞新城疫抗體金標檢測卡 | 20T/盒 | 金標層析卡 |
JL3104 | 新城疫血凝及血凝抑制試驗抗原 | 2ml | 用于禽新城疫免疫效果的監(jiān)測 |
JL3105 | 新城疫血凝及血凝抑制試驗陽性血清 | 2ml | |
JL3106 | 新城疫病毒RT/盒-PCR檢測試劑盒 | 10T/盒 | PCR |
JL3401 | 法氏囊抗體檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3402 | 法氏囊抗體金標檢測卡 | 40T/盒 | 金標層析卡 |
JL3403 | 法氏囊抗原金標檢測卡 | 40T/盒 | 金標層析卡 |
JL3107 | 禽腦脊髓炎抗體檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3108 | 禽呼腸孤抗體檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3110 | 鴨禽流感病毒抗體檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3601 | 雞傳染性喉氣管炎抗體檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3602 | 雞傳染性喉氣管炎抗體金標檢測卡 | 40T/盒 | 金標層析卡 |
JL3701 | 雞減蛋綜合癥EDS76抗體檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3702 | 雞減蛋綜合癥EDS76抗體金標檢測卡 | 40T/盒 | 金標滲濾卡 |
JL3801 | 雞病毒性關(guān)節(jié)炎抗體檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3010 | 禽流感病毒RT-PCR檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3011 | 禽流感抗體檢測試劑盒 | 96T/盒 | ELISA JL |
JL3012 | 禽流感抗原金標檢測卡 | 20T/盒 | 金標層析卡 |
JL3013 | 禽流感H5抗原金標檢測卡 | 20T/盒 | 金標層析卡 |
JL3014 | 禽流感H9抗體金標檢測卡 | 20T/盒 | 金標層析卡 |